Y187 Chemically Competent Cell

2022年7月30日 作者 jinpanbio

Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析:Y187是GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(如Y2HGold,AH109等)通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

Y187 Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

 

产品标签

Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGoldpGBKT7Y187pGADT7AUR1-CAureobasidin A AbA);金担子素;

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Y187 Chemically Competent Cell 

酵母菌化学感受态细胞

MF2354-1000UL

10×100μl

290

MF2354-5000UL

50×100μl

1320

产品包装

组分编号

组分名称

保存

货号(规格)

MF2354-1000UL

MF2354-5000UL

MF2354-A

Y187 Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2354-B

pGADT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2354-C

Carrier DNA (5μg/μl)

-20

100μl 

500μl 

MF2354-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml

产品描述

Y187GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(如Y2HGoldAH109等)通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y187-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7pGADT7。前者筛选标志为Trp1,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y187有两个报告基因:lacZMEL1,分别由两种完全异源的Gal4反应启动元件-G1M1操控,这两种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同,因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。

本品为经特殊工艺制备的Y187酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met-, gal80Δ, URA3:: GAL1UASGal1TATA– lacZ, MEL1

注意事项

1.在冰上融化感受态细胞。

2.转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。

3.Y187对高温敏感,zui适生长温度为27-30,一旦高于31,生长速度和转化率都呈指数下降。

4.菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4567基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazoleAIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。

5.酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于2948h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于2948-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于2960-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于2980-90h培养可见直径1mm克隆;

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

相关产品

货号

名称

规格

MF2351-300UL

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

300μl

MF2352-1000UL

Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

10×100μl

MF2353-300UL

Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

300μl

MF2354-1000UL

Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

10×100μl

MF2355-300UL

AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

300μl

MF2356-1000UL

AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞

10×100μl

MF2501-200T

Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒

200T

MS6303-350G

YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基

350g

MS6304-250G

YPDA Medium YPDA液体培养基

250g

 

 — —Written/Edited by V. Shallan版权归MKBio所有

 

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Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析

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