Jinpan分子试剂 | BETHYL抗体金畔生物官网

金畔生物PCR试剂,疫苗评价CRO服务

疫苗评价CRO服务

背景

自新冠病毒流行爆发以来，在国家药品监督管理局的部署下，2020年8月药审中心组织制定了《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则（试行）》等一系列指导原则。原则中指出对于新冠疫苗的生物效价检测，要求进行体液免疫的指标评价，必要时对细胞免疫等其他免疫也进行相关研究，特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗，如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台以及假病毒构建平台，自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒以及HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品，并积极参与了国内各种新冠疫苗技术路线的临床前和临床研究工作，建立起对体液免疫和细胞免疫等的方法学。金畔生物为您提供新冠疫苗评价服务，从临床前到临床“一站式”解决方案，助力疫苗的快速上市！

生物样本分析

1. 体液免疫检测

A. 基于新冠假病毒系统的中和活性检测服务

金畔生物新冠假病毒系统基于非复制型慢病毒，具有较高的安全性。该慢病毒外壳插入新冠病毒Spike蛋白，可以高度模拟新冠病毒经细胞表面受体ACE2而侵入细胞的机制；假病毒携带萤火虫荧光素酶报告基因，感染目的细胞的程度与发光信号成正比。

【服务详情】

样本类型	血清、血浆或抗体等样本，由客户自行提供
检测试剂	金畔生物提供实验所需HEK293-ACE2稳转细胞系，表达新冠病毒Spike蛋白的假病毒
质控标准品	提供的阳性对照(人源化多抗)
交付文件	项目检测报告及原始数据
检测周期	8-10个工作日
服务优势	1.技术平台：金畔生物自主研发了HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品； 2.突变株种类齐全：WT、Delta、Omicron(包括亚型BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/BA.5、BA.2.12.1)等响应速度快； 3.检测能力：检测通量高，已为多家疫苗公司及科研机构提供假病毒中和抗体检测服务，保证结果真实可靠

【数据展示】

使用假病毒系统，在P2安全等级实验室条件下，测评具有潜在中和活性的候选抗体，并绘制抑制曲线(图1)。经P3实验室真病毒感染Vero E6的体外中和功能验证，确认候选抗体体外真病毒中和功能活性与本次假病毒试验结果基本一致。

供试品免疫小鼠后，于不同时间点收集血清，检测免疫后小鼠血清中针对WT假病毒毒株的中和抗体水平(图2)。

疫苗评价CRO服务

假病毒相关产品详情<<<<

B. 基于ELISA的结合抗体检测服务

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

【服务详情】

样本类型	血清、血浆等样本，由客户自行提供
检测试剂	小鼠新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒小鼠新型冠状病毒Spike (Delta)抗体(IgG)检测试剂盒小鼠新型冠状病毒Spike (Omicron)抗体(IgG)检测试剂盒新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)定量检测试剂盒
交付文件	项目检测报告及原始数据
检测周期	8-10个工作日
服务优势	1.技术平台：金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台，自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒； 2.检测能力：响应速度快，已为多家疫苗企业及科研单位提供抗体检测服务； 3.可针对突变株(Delta、Omicron)进行结合抗体的检测

【案例展示】

用ELISA法半定量的方法（起始稀释倍数为500），测定小鼠血清中的新型冠状病毒的S相关IgG抗体。

表1 小鼠血清S IgG抗体滴度检测结果汇总表

样品编号 Sample Number	滴度值 Titer Value of Antibody
空白组1	<500
空白组2	<500
低剂量1	4500
低剂量2	500
高剂量1	13500
高剂量2	13500

(注：表中数据为我司内部研发数据)

试验结果判断：

样本A值≥500，则测试样本为IgG抗体检测阳性。

样本A值<500，则测试样本为IgG抗体检测阴性。

Elisa试剂盒相关产品详情<<<<

2. 细胞免疫检测

《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则(试行)》指南中明确提出，对于新冠疫苗的生物效价检测，由于对病原体认知有限及不同类型疫苗免疫机制不尽相同，鼓励对细胞免疫水平的生物学活性开展相关研究，特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗，如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。因此细胞免疫检测具有重要意义。

C. 基于ELISpot的细胞因子检测服务

【检测原理】

在以PVDF膜为基质的96孔板中预先包被抗细胞因子的抗体，待检细胞与抗原刺激物共同在板孔中孵育，受到刺激后的待检细胞会产生细胞因子，细胞因子当即就被位于细胞下方的膜上的单克隆抗体所捕获。在洗去细胞之后，被捕获的细胞因子可以与生物素标记的第二抗体结合，然后用酶标亲和素再与生物素结合，进行化学酶联显色就会形成清晰可辨的斑点，一个斑点代表着一个能够产生细胞因子的细胞。根据斑点数目就可以分析分泌该细胞因子的细胞的频率，可直观的展示出细胞免疫的效果。

【服务详情】

样本类型	脾细胞、PBMC等，由客户自行提供
检测指标	IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子
交付文件	项目检测报告
检测周期	8-10个工作日
服务优势	可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库；可进行方法学验证

【案例展示】

利用野生株S蛋白肽库刺激小鼠脾细胞，检测疫苗免疫后T细胞免疫反应效果，即可通过斑点数监测细胞因子的表达。

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图 3

D. 基于ICS的细胞因子检测服务

【检测原理】

用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合，即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌情况。不同于传统的细胞表面抗体染色，此方法先对细胞进行固定，以便稳定细胞膜和交联蛋白质，之后破膜处理，使抗体进入细胞内结合胞内细胞因子并显色。利用3激光10色流式细胞仪，检测疫苗免疫后的T细胞免疫，分析Th1和Th2比例。

【服务详情】

样本类型	脾细胞、PBMC等，由客户自行提供
检测指标	IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子
交付文件	项目检测报告
检测周期	15-20个工作日
服务优势	可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库

【案例展示】

利用ICS技术从单细胞水平上分析不同类型细胞因子的表达和对应细胞因子的细胞类型，用多种荧光标记单克隆抗体可在同一细胞水平上，同时测定多种不同的细胞因子表达情况。

疫苗评价CRO服务

图 4

服务流程

业务咨询 → 签订合同 → 样品收验 → 实验检测 → 出具报告 → 交付结果

金畔生物PCR试剂,Taq Pro HS DNA Polymerase for ddPCR

Taq Pro HS DNA Polymerase for ddPCR

优异的扩增灵敏度，满足低模板检测需求

阴阳结果区分度高，微滴生成均一且稳定

较强的稳定性，为检测提供保障

较强的杂质耐受力

Taq Pro HS DNA Polymerase for ddPCR

Taq Pro HS DNA Polymerase是基于抗体法修饰，经过升级改造提升模板亲和能力的新一代热启动DNA聚合酶。搭配针对PCR/qPCR/ddPCR系统优化的适合Buffer，显著提高了扩增特异性和低拷贝基因的检测灵敏度，促进ddPCR中液滴的均匀生成，且不易发生融合。本产品适用于DNA模板(如DNA病毒)的探针法定量PCR检测，能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。对于模板类型、模板GC含量和引物Tm值等具有广泛的兼容性，同时具有良好的杂质耐受性能，适用多种检测场景。

Taq Pro HS DNA Polymerase for ddPCR

较强的稳定性

Taq Pro HS DNA Polymerase for ddPCR

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输

金畔生物PCR试剂,Taq HS DNA Polymerase

Taq HS DNA Polymerase

优异的扩增线型

更高的扩增灵敏度

预混液加压平台稳定性提高

具有更高稳定性和检出率

Taq HS DNA Polymerase

Taq HS DNA polymerase是由Champagane Taq antibody与Taq DNA polymerase经过一定比例混合得到的热启动Taq酶。基于Champagane Taq antibody的热稳定特性，Taq HS DNA polymerase在55℃下仍可保持严格的封闭性，使得混样和体系升温阶段非特异扩增被抑制到较低程度。当反应在95℃保持30 sec以上时，Champagane Taq antibody彻底失活，Taq酶活性被完全释放，保证了PCR体系具有较高的扩增灵敏度和特异性。Taq HS DNA polymerase的激活不受缓冲液pH、离子强度等因素的影响，适用于各种基于Taq DNA polymerase的热启动PCR、qPCR反应，常用于从复杂模板(基因组，cDNA)中扩增低拷贝基因，是基于PCR/qPCR分子诊断试剂的用热启动Taq酶。此产品具有更高稳定性和检出率。

Taq HS DNA Polymerase

1. 优异的扩增灵敏度和平台期

Taq HS DNA Polymerase 将Vazyme # P132与相同的三类产品在相同体系下，进行qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况。从结果可以看出，Vazyme # P132具有更高的灵敏度和更好的平台期。

Taq HS DNA Polymerase

多重体系下的对比实验表明，在相同条件的情况下，对同一个样本的4个靶标基因进行qPCR扩增，Vazyme # P132扩增的平台期和线形均优于竞品试剂(T公司)。

2. 更高的检出率

试剂	模板			NTC	总分
	10^-9	*510^-10**	10^-10
P122-MD2	7/8	7/8	0/8	0/4	14
P132	7/8	7/8	2/8	0/4	16
Supplier T1	7/8	5/8	1/8	0/4	13
Supplier T2	8/8	7/8	0/8	0/4	15
Supplier H1	8/8	5/8	0/8	0/4	13
Supplier H2	8/8	6/8	0/8	0/4	14
Supplier P1	7/8	6/8	0/8	0/4	13
Supplier P2	8/8	4/8	0/8	0/4	12
Supplier P3	7/8	7/8	0/8	0/4	14

3. 产品稳定性测试

Taq HS DNA Polymerase

组分	P132-d1 500 U (5 U/μl)	P132-d2 1,000 U (5 U/μl)	P132-d3 5,000 U (5 U/μl)
10 × Taq HS Buffer (Mg²⁺ plus)	2 × 1 ml	4 ml	20 ml
dNTP Mix (10 mM each)	400 μl	800 μl	4 ml
Taq HS DNA polymerase (5 U/μl)	100 μl	200 μl	1 ml

Taq HS DNA Polymerase

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

95℃加热 30 s 即可完全释放 Taq 酶活性

较高的扩增灵敏度和特异性

对各种 PCR/qPCR 体系具有兼容性

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

本品为不含甘油的Taq HS DNA polymerase，可以用于冻干。Taq HS DNA polymerase是由Champagne Taq antibody与Taq DNA polymerase经过一定比例混合得到的热启动Taq酶。基于Champagne Taq antibody的热稳定特性，Taq HS DNA polymerase在55℃下仍可保持严格的封闭性，使得混样和体系升温阶段非特异扩增被抑制到较低程度。当反应在95℃保持30 sec以上时，Champagne Taq antibody彻底失活，Taq酶活性被完全释放，保证了PCR体系具有较高的扩增灵敏度和特异性。Taq HS DNA polymerase的激活不受缓冲液pH、离子强度等因素的影响，适用于各种基于Taq DNA polymerase的热启动PCR、qPCR反应，常用于从复杂模板(基因组，cDNA)中扩增低拷贝基因，是基于PCR/qPCR分子诊断试剂的热启动Taq酶。

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

优异的扩增性能

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

将Vazyme # QL101与相同的三类产品在相同体系下，进行qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况。从结果可以看出，Vazyme # QL101具有更高的灵敏度和更好的平台期。

宽广的体系兼容性

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

同样的，在多重体系下也进行对比实验。可以看出条件相同的情况下，FAM、VIC、CY5三个通道，试剂表现情况Vazyme # QL101≈Supplier M>Supplier T>Supplier P。

综上，Vazyme # QL101扩增性能优异且对各种体系具有较好的兼容性。

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

组分

QL101-01

1,000 U (5 U/μl)

QL101-02

5,000 U (5 U/μl)

QL101-03

50,000 U (5 U/μl)

Taq HS DNA polymerase(Glycerol-free)(5 U/µl)

200 µl

1 ml

10×1 ml

Taq HS DNA Polymerase (Glycerol-free)

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

金畔生物新一代AccurSTART无甘油一步法RT-qPCR预混液

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

灵敏高效：扩增性能优异

储存稳定：加压和冻融稳定性优越

兼容耐杂：可兼容粪便、组织及拭子等多类型样本

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)是一款以RNA为模板(如RNA病毒)的无甘油一步法RT-qPCR试剂，适用于冻干产品的开发设计。本产品整合一步法专用Reverse Transcriptase以及热启动Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，搭配精心优化的可冻干化学缓冲，具有更优的扩增效率、均衡性和特异性，可兼容不同的冻干工艺。此外，试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

1. 扩增性能优越

针对不同体系，分别使用QL227与其他品牌的无甘油一步法试剂进行扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增性能。结果显示，QL227在不同体系下的扩增性能均优于对照试剂，扩增性能表现优异。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

2. 储存稳定

将QL227分别做不同温度存放和冻融处理，以-20℃储存的试剂为对照，通过扩增性能测试试剂稳定性。结果显示，测试组和对照组试剂的Ct值相差均在±0.5以内，表明QL227具有优异的稳定性。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (Glycerol-free)

-30～ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

新一代一步法RT-qPCR快检试剂

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

快速扩增：能够实现 30min 扩增，提高实验效率

兼容耐杂：可兼容鼻咽拭子样本粗裂解液

灵敏高效：可实现低浓度样本稳定检出

DNA/RNA 共检：可稳定实现 DNA、RNA 模板的均衡扩增

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

AccurSTART U⁺One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)是一款探针法RT-qPCR快速检测试剂盒，适用于以RNA为模板 ( 如RNA病毒 ) 的单重或多重定量PCR。本产品使用新一代抗体修饰的Taq DNA Polymerase与一步法专用Reverse Transcriptase，搭配专为快速扩增优化的缓冲体系，具有更快的扩增速度、更高的扩增效率以及特异性，可在较短时间内完成多重均衡扩增。此外，本产品引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR 的影响，保证结果的准确性。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

实现 30 min 内快速扩增

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 经精心优化，能够耐受较快的升降温速率，实现在ABI Q3 仪器上 30 min 扩增。结果显示，Q231 在快速程序和常规程序下的 CT 值差异在 ±1 之间，平台期差在 10% 之内。

样本兼容性

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 和其他市面品牌的RT-qPCR 试剂，分别扩增粪便和组织等不同类型的样本。计算对照组和测试组的 CT 值差异，结果表明，Q231 在不同类型样本中的扩增灵敏度均优于对照试剂。

体系1

体系2

低浓度稳定检出

以低浓度新冠假病毒为模板，使用 AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)（Vazyme #Q231）进行扩增。结果表明，在两个多重体系中，32 个低浓度样本检出率均达到 95% 以上。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

更高的检测灵敏度

适用于多重qPCR

兼容快速程序

更优越的储存稳定性

高低模板浓度扩增均衡

引入 dUTP/UDG 防污染系统

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript^® III U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit专为以RNA为模板（RNA病毒）的定量PCR检测而设计。整合HiScript^® III Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，逆转录和qPCR反应在一管内完成，不需要额外的开管/移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。该产品还引入了dUTP/UDG防污染系统，并且适用于TaqMan等荧光标记探针的高特异性检测系统。此外，本产品还可提供可以冻干的无甘油版本预混液。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

优异的扩增性能

HiScript^® III U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit（Vazyme#Q225）和其他品牌的qRT-PCR试剂进行扩增检测。结果表明，Vazyme#Q225在单重体系和多重体系中扩增性能均优于其他品牌。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

优越的储存稳定性

Q225处理组进行反复冻融10次、30次、50次；37℃加压1天、3天、5天、7天，处理组与正常-20℃保存的对照组在不同体系、不同浓度下进行扩增比较。结果表明，Vazyme#Q225试剂具有优越的储存稳定性。

冻融测试：10次、30次、50次

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

37℃测试：1天、3天、5天、7天

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

组分	Q225-01 100 rxns (30 μl/rxn)	Q225-02 1,000 rxns (30 μl/rxn)	Q225-03 5,000 rxns (30 μl/rxn)
RNase-free ddH₂O	2 × 1 ml	20 ml	100 ml
5 × One Step U⁺ Mix^a	600 μl	6 × 1 ml	30 ml
One Step U⁺ Enzyme Mix^b	150 μl	2 × 750 μl	7.5 ml
50 × ROX Reference Dye 1^c	60 μl	600 μl	3 × 1 ml
50 × ROX Reference Dye 2^c	60 μl	600 μl	3 × 1 ml

a. 包含dNTP/dUTP Mix、Mg²⁺等。

b. 包含HiScript III Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Champagne Taq DNA Polymerase。

c. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500、7500 Fast Real-Time PCR System、Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche、Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit

高灵敏度探针法qRT-PCR预混液

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

优异的扩增灵敏度：整合HiScript^® II Reverse Transcriptase及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，提升了检测灵敏度

UDG防污染系统：热敏感(Heat-labile)UDG在室温下即可将含U的污染物迅速降解；55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不会影响qRT-PCR的效率和灵敏度

支持快速程序：兼容快速程序，提高检测效率

兼容多重探针检测

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

1. 优异的扩增灵敏度

选取三个不同的病毒体系，分别使用HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit (Vazyme #Q222-CN)及其他品牌探针法qRT-PCR试剂(Supplier P、Supplier T)，在相同反应条件下进行扩增。结果显示，与同类产品相比，Q222-CN拥有更高的扩增灵敏度及扩增平台。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

病毒体系1

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

病毒体系2

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

病毒体系3

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

图1.不同病毒体系单重扩增示意图

2. 优异的多重体系兼容性

选取两个病毒体系(三重、四重体系)，使用HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit (Vazyme #Q222-CN)进行扩增。结果显示，Q222-CN兼容多重体系扩增。


病毒体系-三重	病毒体系-四重

图2.病毒体系多重扩增示意图

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit专为以RNA为模板(如RNA病毒)的定量PCR检测而设计。检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA或<10拷贝的RNA模板。

本试剂盒中引入了dUTP/UDG防污染系统。热敏感(Heat-labile)UDG在室温下即可将含U的污染物迅速降解；55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不会影响qRT-PCR的效率和灵敏度。试剂盒以便捷的Master Mix形式提供。2×One Step U⁺ Mix包含优化的缓冲体系和dNTP/dUTP mix，适用于TaqMan等荧光标记探针的高特异性检测系统。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

组分	Q222-CN-00 100 rxns (30 μl/rxn)	Q222-CN 5,000 rxns (30 μl/rxn)
RNase-free ddH₂O	2 × 800 µl	76 ml
2×One Step U⁺ Mix^a	2 × 760 µl	2 × 38.4 ml
One Step U⁺ Enzyme Mix^b	154 µl	7.7 ml
50×ROX Reference Dye 1^c	60 µl	3 × 1 ml
50×ROX Reference Dye 2^c	60 µl	3 × 1 ml

a. 包含dNTP/dUTP mix，Mg²⁺。

b. 包含HiScript^® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Champagne Taq DNA Polymerase。

c. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

-30 ~ -15℃保存，运输条件≤0℃。

金畔生物PCR试剂,HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit

无缝衔接 dUTP/UDG 防污染系统与一步探针法 qRT-PCR试剂盒

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

支持多重探针检测

UDG防污染系统： Heat-labile UDG 室温下迅速降解含U 的双链DNA 污染物，Heat-labile UDG 在50-55℃迅速失活，维持cDNA 的完整性

高的检测灵敏度：可检测到个位数拷贝的模板或 0.1 pg 总 RNA

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

图1. HiScript^®II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit 工作原理

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

图2. 以 HeLa 细胞总 RNA 为模板，用 HiScript^® II U⁺ One Step qRT-PCR Probe Kit 扩增 RFLPO 基因

由图可见，优化的 dUTP 浓度以及 Heat-labile UDG 使得扩增效率和灵敏度不会受到影响。相比之下，E.coli 来源的 UDG 会严重影响 One Step RT-qPCR的检测灵敏度。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

dUTP/UDG 防污染系统是一种非常有效的控制 PCR 扩增产物污染的手段。在以 DNA 为模板的 PCR 检测试剂中，已逐渐成为了一种强制标准。不过，常用的 E. coli UDG 在通常的逆转录温度 (42-55℃ ) 下仍具有较高的活性，会降解 cDNA，导致 One Step RT-PCR/qPCR 的灵敏度降低。

HiScript^® II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit 含有比例优化的dUTP/dNTP mix，并加入了来源于嗜冷海洋细菌的Heat-labile UDG。Heat-labile UDG在室温下具有很高的活性，在反应体系混合过程中即可充分降解含U的双链DNA。当反应体系升温至50-55℃ (HiScript^® II 的最适反应温度)时，Heat-labile UDG 迅速失活，维持cDNA 的完整性，保证检测灵敏度不受影响。

HiScript II U+ One Step qRT-PCR Probe Kit

– 20℃避光保存

金畔生物PCR试剂,HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

HiScript^®II One Step qRT-PCR Probe Kit

以RNA为模板的探针法qRT-PCR试剂盒

HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

高的检测灵敏度：可检测到个位数拷贝的模板或 0.1 pg 总 RNA

多重检测：支持多重探针检测

HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

图1.A.以1 ng-0.1 pg HeLa 细胞总 RNA 为模板，扩增 RFLPO 基因，线性范围达 5 个数量级，灵敏度可达 0.1 pg。

B.以 10 ⁷ -10¹拷贝体外转录的 RNA 为模板，扩增 HCV 基因，线性范围达 7 个数量级，灵敏度可达 10 拷贝。

C.以 10^-1 -10^-7 稀释度的鸡胚尿囊液病毒 RNA 为模板，扩增新城疫病毒特异基因，可稳定检测到 10^-7稀释度。

HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

图2. 以鸡胚尿囊液病毒RNA 为模板，使用 HiScript^® II One Step qRT-PCR Probe Kit 同时扩增禽流感 F 和 M 基因

荧光通道为 FAM (M 基因 ) 和 HEX (F 基因 )。可见，双重 PCR 体系中，F 和 M 基因的扩增效率和灵敏度均与单重 PCR 体系中基本一致。

HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

低拷贝数模板或弱阳性样本的检出率仍然是临床诊断的挑战之一。HiScript^® II One Step qRT-PCR Probe Kit含有比例的HiScript^® II Reverse Transcriptase和Champagne Taq DNA Polymerase，以及充分优化的缓冲体系，无论是总RNA，体外转录RNA，或者是病毒RNA，HiScript^® II One Step qRT-PCR Probe Kit都具有较高的灵敏度，提供稳定可靠的扩增表现。无需过多优化，亦可实现多重扩增。

HiScript II One Step qRT-PCR Probe Kit

– 20℃避光保存

金畔生物PCR试剂,HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

HiScript^®II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

以RNA为模板的染料法qRT-PCR试剂盒

HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

优异的特异性：特殊的添加剂成分，较大程度抑制引物二聚体的产生，定量结果更准确

较高的检测灵敏度：兼顾高扩增效率，可检测低至 1 pg 的总RNA 模板

HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

图1. 以 HeLa 细胞总 RNA 为模板，使用 HiScript^® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 及市售其他品牌试剂同时扩增 B2M (A)和 GUSB (B) 基因

与市售其他品牌试剂相比，HiScript^® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 扩增效率更高，具有更小的 C_T值，且在低模板量下几乎没有引物二聚体产生。

HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

HiScript^® II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit 采用 SYBR Green I 嵌合荧光法，专为以 RNA 为模板( 如 RNA 病毒) 的定量 PCR 检测而设计。使用基因特异引物 (GSP)，逆转录和 PCR 反应在一管内完成，不需要额外的开管/移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。整合 HiScript^® II Reverse Transcriptase 以及 Champagne Taq DNA Polymerase 的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，检测灵敏度可达到 1 pg 总 RNA。缓冲液中加入的特异性增强因子，可以有效减少引物二聚体的形成，提高特异性。

HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit

-20℃避光保存

金畔生物PCR试剂,AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

新一代AccurSTART一步法RT-qPCR单管预混液

支持引物探针提前预混，加入模板即可反应

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

探针引物提前预混：探针引物可提前加入预混液中，性能保持稳定

DNA/RNA 共检：稳定实现 DNA、RNA 模板的灵敏扩增

灵敏高效：实现个位数拷贝模板稳定检出

多重扩增：兼容4-5 重扩增

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)是一管式探针法RT-qPCR专用预混液，适用于以RNA为模板(如RNA病毒) 的单重或多重定量PCR检测。本预混液使用基于酶改造的热启动技术，搭配新一代高亲和力Taq酶抗体，实现了酶的高效封闭、准确释放。配合一步法专用Reverse Transcriptase和优化后的化学缓冲，支持引物探针提前预混，配制成工作液后，低温下可长期保存，使用时直接添加待测样品即可，不需要额外的开管/移液操作。预混液中引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。本产品还可兼容快速程序，大大缩短了检测时间。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

支持探针引物预先加入的全预混试剂

将AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)（Vazyme #Q621）及其他品牌试剂提前加入探针引物配制成工作液，分别进行4℃ 2周、37℃ 5天的加压和50次的冻融，随后以相同体系的现配工作液为对照进行扩增反应。结果表明Q621可以支持探针引物提前加入配制成工作液，保持长期稳定，在后续实验中仅需加入模板即可实现高效扩增。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

模板灵活性

AccurSTART U⁺ One Step RT-qPCR Super PreMix (ONE TUBE)经精心优化，可实现 RNA和DNA靶标特异性检测。在各类待检样本中同时检测RNA和DNA病毒是很常见的。以DNA/RNA为模板，在多重体系中进行检测，结果表明Q621可以同时实现DNA、RNA的检测。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

组分	Q621-01 200 rxn（20 ul/rxn）	Q621-02 1,000 rxn（20 ul/rxn）	Q621-03 10,000 rxn（20 ul/rxn）
RNase-free ddH₂O	1 ml	10 ml	100 ml
U⁺ One Step RT-qPCR Probe 5 × Master Mix^a	800 μl	4×1 ml	40 ml
50×ROX Reference Dye 1^b	80 μl	400 μl	4×1 ml
50×ROX Reference Dye 2^b	80 μl	400 μl	4×1 ml

a. 包含dNTP/dUTP Mix、Mg²⁺、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Heat-labile UDG以及Taq DNA Polymerase。

b. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500、7500 Fast Real-Time PCR System、Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche、Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。

AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Super PreMix（ONE TUBE）

-30～ -15℃保存，≤0℃运输。

金畔生物PCR试剂,HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

扩增性能对标Vazyme#Q225

支持除探针引物外全预混形式

具有较高的稳定性。Vazyme#Q611分别进行4℃存放4周、37℃存放7天、反复冻融10次/30次/50次，经广州、北京、成都三地往返运输7天加压测试，扩增性能保持稳定。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

HiScript^® III U⁺ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix是一管式RT-qPCR预混液，适用于以RNA为模板(如RNA病毒)的单重或者多重定量PCR检测，具有较高的稳定性。检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA或<10拷贝的RNA模板。

预混液中引入了dUTP/UDG防污染系统，室温下即可发挥作用，55℃逆转录时，Heat-labile UDG迅速失活，不影响qRT-PCR的效率和灵敏度。整合HiScript^® III Reverse Transcriptase以及热启动的Champagne Taq DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，适用于TaqMan等荧光标记探针的高灵敏度检测系统。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

扩增性能对标Vazyme#Q225

分别使用Q611(Vazyme)与Q225(Vazyme)在不同体系(病毒体系、Hela体系)进行RT-qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况。结果显示，不同体系下的Vazyme#Q611与Vazyme#Q225的灵敏度一致，ΔCT均在±0.5之间。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

表1：扩增灵敏度对比（Vazyme#Q611 &Vazyme#Q225）

优异的高低模板扩增均衡性

分别使用Vazyme#Q611与竞品TR、NB、TH和ME在不同体系(病毒体系、Hela体系)，对不同模板类型(病毒RNA、HelaRNA)进行梯度稀释，进行RT-qPCR扩增，比较在相同引物探针条件下的扩增情况，包括扩增灵敏度、扩增平台及扩增线型。结果显示，Vazyme#Q611在高低模板扩增的均衡性上表现更好，扩增性能优异。

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

图1:扩增曲线对比示意图（Vazyme#Q611 &竞品）

HiScript III U+ One Step qRT-PCR Probe 5 × Master Mix

-30～ -15℃保存，≤0℃运输

金畔生物PCR试剂,Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

适用于富含GC模板

更高的扩增特异性

优异的扩增线型

良好的杂质耐受性能

兼容快速程序，缩短检测时间

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

Taq Pro HighGC U⁺ Multiple Probe qPCR Mix是一款适用于DNA模板(如DNA病毒)的探针法qPCR专用预混液。核心组分Taq Pro HS DNA Polymerase是基于抗体法修饰，经过升级改造提升模板亲和能力的新一代热启动DNA聚合酶。搭配针对qPCR系统优化的合适Buffer，显著提高了扩增特异性和低拷贝基因的检测灵敏度和扩增线型，能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。本产品适用于富含GC模板的扩增，同时具有良好的杂质耐受性能。试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，室温下即可发挥作用，可消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。本产品是一款2 × 预混液，只需额外加入引物、探针、模板即可，使用方便，同时兼容快速程序，缩短检测时间。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

1. 更优的扩增性能

针对人源基因组DNA，用不同品牌的qPCR试剂扩增检测，结果证明Vazyme品牌Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix（QN211）在FAM/VIC/CY5通道中，灵敏度、平台期与其他品牌相比表现更好。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

2. 引入dUTP/UDG防污染系统

对于4pg、40pg、400pg不同模板投入量的样本，dUTP/UDG防污染的效率均高于99.9%。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

3. 更优的稳定性

a. 扩增性能稳定性

对于稳定性保障，进行4℃、37℃加压和冻融稳定性测试。QN211在4℃条件下加压4周和37℃条件下加压7天，FAM/ROX/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内。处理组进行反复冻融10次、30次、50次，FAM/ROX/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内，扩增平台相差在20%以内。QN211具有优异的存储稳定性。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

b. UDG清除效率

QN211在4℃条件下加压1-4周或冻融10次、30次和50次后，投入4pg、40pg和400pg的模板进行检测，UDG清除效率和对照组相比无明显差异。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

组分	QN211-01 (100 rxns/20 μl reaction)	QN211-02 (500 rxns/20 μl reaction)	QN211-03 (2,500 rxns/20 μl reaction)
2 × Taq Pro HighGC U⁺ Multiple Probe qPCR Mix^a	1 ml	5 × 1 ml	QN211-02 × 5
50 × ROX Reference Dye 1^b	100 μl	200 μl
50 × ROX Reference Dye 2^b	100 μl	200 μl

a. 包含dNTP/dUTP Mix，Mg²⁺，Taq Pro HS DNA Polymerase，Heat-labile UDG等。

b. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500，7500 Fast Real-Time PCR System，Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche，Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。

Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输

金畔生物PCR试剂,Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

低模板良好的扩增灵敏度和S型曲线

支持快速程序

支持多重qPCR

dUTP/UDG防污染系统

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

Taq Pro U⁺ Multiple Probe qPCR Mix是一款适用于DNA模板(如DNA病毒)的探针法qPCR专用预混液。核心组分Taq Pro HS DNA Polymerase是基于抗体法修饰，经过升级改造提升模板亲和能力的新一代热启动DNA聚合酶。搭配经过优化的缓冲体系，显著提高了多重靶标下的扩增性能、扩增特异性、低拷贝基因的检测灵敏度和扩增线型，能够对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。对于模板类型、模板GC含量和引物Tm值等具有广泛的兼容性。试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，室温下即可发挥作用，可消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。此外，本产品只需额外加入引物、探针、模板即可，还可以兼容快速程序，缩短检测时间。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

1. 更优的扩增性能

针对人源基因组DNA与鼠源基因组DNA，用Vazyme品牌与T品牌的qPCR试剂扩增检测，结果证明Vazyme品牌Taq Pro U⁺ Multiple Probe qPCR Mix（QN213）在FAM/VIC/CY5通道中，灵敏度、平台期与T品牌相比表现更好。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

2. 引入dUTP/UDG防污染系统

对于4pg、40pg、400pg不同模板投入量的样本，dUTP/UDG防污染的效率均高于99.0%。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

3.更优的稳定性

a. 扩增性能稳定性

对于稳定性保障，进行4℃、37℃加压和冻融稳定性测试。QN213在4℃条件下加压4周和37℃条件下加压7天，FAM/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内。处理组进行反复冻融10次、30次、50次，FAM/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内，扩增平台相差在20%以内。QN213具有优秀的存储稳定性。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

b.UDG清除效率

对于UDG清除效率的稳定性保障，进行4℃加压和反复冻融稳定性测试。QN213在4℃条件下加压1-4周或冻融10次、30次和50次后，投入4pg、40pg和400pg的模板进行检测，UDG清除效率与对照组相比无明显差异。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

组分	QN213-01 (100 rxns/20 μl reaction)	QN213-02 (500 rxns/20 μl reaction)	QN213-03 (2,500 rxns/20 μl reaction)
2 × Taq Pro U⁺ Multiple Probe qPCR Mix^a	1 ml	5×1 ml	QN213-02×5
50 × ROX Reference Dye 1^b	100 μl	200 μl
50 × ROX Reference Dye 2^b	100 μl	200 μl

a. 包含dNTP/dUTP Mix，Mg²⁺，Taq Pro HS DNA Polymerase，Heat-labile UDG等。

Taq Pro U+ Multiple Probe qPCR Mix

-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输

2025年1月
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