丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF/Sephacryl S-1000 Superfine/

详细介绍

“丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF
别名:Sephacryl S-1000 Superfine
货号:JS11694
CAS号:
规格:葡聚糖分离范围5×105~1×108
包装:750毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF,规格:葡聚糖分离范围5×105~1×108,750毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran/ 高纯,分子量50万 10克
葡聚糖/Dextran/9004-54-0 BR,分子量10万-20万 10克
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量1万 10克
葡聚糖T6/Dextran T6/9004-54-0 BR,分子量6000 10克
葡聚糖T10/Dextran T10/9004-54-0 BR,分子量1万 10克
葡聚糖T20/Dextran T20/9004-54-0 BR,分子量2万 10克
葡聚糖T110/Dextran T110/9004-54-0 BR,分子量11万 10克
葡聚糖T1000/Dextran T1000/9004-54-0 BR,分子量100万 10克
聚蔗糖400/Ficoll400/26873-85-8 BR,分子量40万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF/Sephacryl S-1000 Superfine/

丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR/Sephacryl S-500 High resolution/65

详细介绍

“丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR
别名:Sephacryl S-500 High resolution
货号:JS11693
CAS号:65546-95-4
规格:葡聚糖分离范围4×104~2×107
包装:150毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR,规格:葡聚糖分离范围4×104~2×107,150毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
蓝色葡聚糖2000/Dextran blue 2000/87915-38-6 BR,分子量200万 1克
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran/ 高纯,分子量50万 10克
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量6.4万-7.6万 10克
葡聚糖T5/Dextran T5/9004-54-0 BR,分子量5000 10克
葡聚糖T9/Dextran T9/9004-54-0 BR,分子量9000 10克
葡聚糖T11/Dextran T11/9004-54-0 BR,分子量1.1万 10克
葡聚糖T100/Dextran T100/9004-54-0 BR,分子量10万 10克
葡聚糖T500/Dextran T500/9004-54-0 BR,分子量50万 10克
聚蔗糖70/Ficoll70/26873-85-8 BR,分子量7万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR/Sephacryl S-500 High resolution/65

丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR/Sephacryl S-400 High resolution/65

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“丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR
别名:Sephacryl S-400 High resolution
货号:JS11692
CAS号:65546-95-4
规格:球蛋白分离范围2×104~8×106;葡聚糖分离范围1×104~2×106
包装:150毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR,规格:球蛋白分离范围2×104~8×106;葡聚糖分离范围1×104~2×106,150毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF/Sephacryl S-1000 Superfine/ 葡聚糖分离范围5×105~1×108 750毫升
蓝色葡聚糖2000/Dextran blue 2000/87915-38-6 BR,分子量200万 1克
葡聚糖/Dextran/9004-54-0 BR,分子量10万-20万 10克
葡聚糖T4/Dextran T4/9004-54-0 BR,分子量4000 10克
葡聚糖T7/Dextran T7/9004-54-0 BR,分子量7000 10克
葡聚糖T10/Dextran T10/9004-54-0 BR,分子量1万 10克
葡聚糖T70/Dextran T70/9004-54-0 BR,分子量7万 10克
葡聚糖T200/Dextran T200/9004-54-0 BR,分子量20万 10克
葡聚糖T2000/Dextran T2000/9004-54-0 BR,分子量200万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR/Sephacryl S-400 High resolution/65

丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR/Sephacryl S-300 High resolution/

详细介绍

“丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR
别名:Sephacryl S-300 High resolution
货号:JS11691
CAS号:65546-95-4
规格:球蛋白分离范围1×104~1.5×106;葡聚糖分离范围2×103~4×105
包装:150毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR,规格:球蛋白分离范围1×104~1.5×106;葡聚糖分离范围2×103~4×105,150毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR/Sephacryl S-500 High resolution/65546-95-4 葡聚糖分离范围4×104~2×107 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF/Sephacryl S-1000 Superfine/ 葡聚糖分离范围5×105~1×108 750毫升
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran/ 高纯,分子量50万 10克
葡聚糖T3/Dextran T3/9004-54-0 BR,分子量3000 10克
葡聚糖T6/Dextran T6/9004-54-0 BR,分子量6000 10克
葡聚糖T9/Dextran T9/9004-54-0 BR,分子量9000 10克
葡聚糖T50/Dextran T50/9004-54-0 BR,分子量5万 10克
葡聚糖T110/Dextran T110/9004-54-0 BR,分子量11万 10克
葡聚糖T1000/Dextran T1000/9004-54-0 BR,分子量100万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR/Sephacryl S-300 High resolution/

丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR/Sephacryl S-200 High resolution/65

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“丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR
别名:Sephacryl S-200 High resolution
货号:JS11690
CAS号:65546-95-4
规格:球蛋白分离范围5×103~2.5×105;葡聚糖分离范围1×103~8×104
包装:150毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR,规格:球蛋白分离范围5×103~2.5×105;葡聚糖分离范围1×103~8×104,150毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR/Sephacryl S-400 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围2×104~8×106;葡聚糖分离范围1×104~2×106 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR/Sephacryl S-500 High resolution/65546-95-4 葡聚糖分离范围4×104~2×107 150毫升
蓝色葡聚糖2000/Dextran blue 2000/87915-38-6 BR,分子量200万 1克
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量1万 10克
葡聚糖T5/Dextran T5/9004-54-0 BR,分子量5000 10克
葡聚糖T7/Dextran T7/9004-54-0 BR,分子量7000 10克
葡聚糖T40/Dextran T40/9004-54-0 BR,分子量4万 10克
葡聚糖T100/Dextran T100/9004-54-0 BR,分子量10万 10克
葡聚糖T500/Dextran T500/9004-54-0 BR,分子量50万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR/Sephacryl S-200 High resolution/65

丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR/Sephacryl S-100 HR/65546-95-4

详细介绍

“丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR
别名:Sephacryl S-100 HR
货号:JS11689
CAS号:65546-95-4
规格:球蛋白分离范围1×103~1×105
包装:100毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR,规格:球蛋白分离范围1×103~1×105,100毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR/Sephacryl S-300 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围1×104~1.5×106;葡聚糖分离范围2×103~4×105 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR/Sephacryl S-400 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围2×104~8×106;葡聚糖分离范围1×104~2×106 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF/Sephacryl S-1000 Superfine/ 葡聚糖分离范围5×105~1×108 750毫升
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量6.4万-7.6万 10克
葡聚糖T4/Dextran T4/9004-54-0 BR,分子量4000 10克
葡聚糖T6/Dextran T6/9004-54-0 BR,分子量6000 10克
葡聚糖T20/Dextran T20/9004-54-0 BR,分子量2万 10克
葡聚糖T70/Dextran T70/9004-54-0 BR,分子量7万 10克
葡聚糖T200/Dextran T200/9004-54-0 BR,分子量20万 10克

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丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR/Sephacryl S-100 HR/65546-95-4

琼脂糖凝胶CL-2B/Sepharose CL-2B/65099-79-8

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“琼脂糖凝胶CL-2B
别名:Sepharose CL-2B
货号:JS11687
CAS号:65099-79-8
规格:分离范围70×103~40×106
包装:100毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

琼脂糖凝胶CL-2B,规格:分离范围70×103~40×106,100毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR/Sephacryl S-200 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围5×103~2.5×105;葡聚糖分离范围1×103~8×104 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR/Sephacryl S-300 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围1×104~1.5×106;葡聚糖分离范围2×103~4×105 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR/Sephacryl S-500 High resolution/65546-95-4 葡聚糖分离范围4×104~2×107 150毫升
葡聚糖/Dextran/9004-54-0 BR,分子量10万-20万 10克
葡聚糖T3/Dextran T3/9004-54-0 BR,分子量3000 10克
葡聚糖T5/Dextran T5/9004-54-0 BR,分子量5000 10克
葡聚糖T11/Dextran T11/9004-54-0 BR,分子量1.1万 10克
葡聚糖T50/Dextran T50/9004-54-0 BR,分子量5万 10克
葡聚糖T110/Dextran T110/9004-54-0 BR,分子量11万 10克

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琼脂糖凝胶CL-2B/Sepharose CL-2B/65099-79-8

琼脂糖凝胶CL-4B/Sepharose CL-4B/61970-08-9

详细介绍

“琼脂糖凝胶CL-4B
别名:Sepharose CL-4B
货号:JS11686
CAS号:61970-08-9
规格:分离范围70×103~20×106
包装:100毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

琼脂糖凝胶CL-4B,规格:分离范围70×103~20×106,100毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR/Sephacryl S-100 HR/65546-95-4 球蛋白分离范围1×103~1×105 100毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR/Sephacryl S-200 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围5×103~2.5×105;葡聚糖分离范围1×103~8×104 150毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR/Sephacryl S-400 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围2×104~8×106;葡聚糖分离范围1×104~2×106 150毫升
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran/ 高纯,分子量50万 10克
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量1万 10克
葡聚糖T4/Dextran T4/9004-54-0 BR,分子量4000 10克
葡聚糖T10/Dextran T10/9004-54-0 BR,分子量1万 10克
葡聚糖T40/Dextran T40/9004-54-0 BR,分子量4万 10克
葡聚糖T100/Dextran T100/9004-54-0 BR,分子量10万 10克

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琼脂糖凝胶CL-4B/Sepharose CL-4B/61970-08-9

琼脂糖凝胶CL-6B/Sepharose CL-6B/62610-50-8

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“琼脂糖凝胶CL-6B
别名:Sepharose CL-6B
货号:JS11685
CAS号:62610-50-8
规格:分离范围10×103~4×106
包装:100毫升
保存条件:2~8℃

产品详细资料如下:

琼脂糖凝胶CL-6B,规格:分离范围10×103~4×106,100毫升,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
琼脂糖凝胶CL-2B/Sepharose CL-2B/65099-79-8 分离范围70×103~40×106 100毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR/Sephacryl S-100 HR/65546-95-4 球蛋白分离范围1×103~1×105 100毫升
丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR/Sephacryl S-300 High resolution/65546-95-4 球蛋白分离范围1×104~1.5×106;葡聚糖分离范围2×103~4×105 150毫升
蓝色葡聚糖2000/Dextran blue 2000/87915-38-6 BR,分子量200万 1克
葡聚糖/Dextran/ BR,分子量6.4万-7.6万 10克
葡聚糖T3/Dextran T3/9004-54-0 BR,分子量3000 10克
葡聚糖T9/Dextran T9/9004-54-0 BR,分子量9000 10克
葡聚糖T20/Dextran T20/9004-54-0 BR,分子量2万 10克
葡聚糖T70/Dextran T70/9004-54-0 BR,分子量7万 10克

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琼脂糖凝胶CL-6B/Sepharose CL-6B/62610-50-8

PVDF膜/Polyvinylidene Fluoride Membrane/

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“PVDF膜
别名:二氟化树脂膜 Polyvinylidene Fluoride Membrane
货号:JS11741
CAS号:
规格:0.45um
包装:13.5×15cm/张
保存条件:常温

产品详细资料如下:

PVDF膜,规格:0.45um,13.5×15cm/张,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
封口膜/Parafilm/ 4″×125 ft 1卷
封板膜/Microplate Sealers/ 专门封板用 100张/包
F型微孔滤膜/Millipore filter(F type)/ Φ130.45u 200张/盒
变色硅胶/Silicagel self indicator/112926-00-8 AR 500克
硅胶G/Silica gel G/112926-00-8 TLC 500克
硅胶GF254/Silica gel GF254/112926-00-8 TLC 500克
硅胶板GF/Silica gel GF Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,7.5×10㎝ 20片/箱
硅胶板HF254/High Silica gel HF254 Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,2.5×10㎝ 80片/箱
聚酰胺-6-薄膜/Polyamide film 6/63428-83-1 层析,8×8㎝ 50片/盒

咨询“PVDF膜”的相关信息。”
 

PVDF膜/Polyvinylidene Fluoride Membrane/

杂交袋

详细介绍

“杂交袋
别名:Seal-A-Meal
货号:JS11737
CAS号:
规格:15×25㎝
包装:100张/包
保存条件:常温

产品详细资料如下:

杂交袋,规格:15×25㎝,100张/包,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
乙酸纤维素薄膜/Cellulose acetate layer sheets/ 2×8cm 100张
尼龙膜N+/Hybond-N+/ 0.45um 15×20cm/张
F型微孔滤膜/Millipore filter(F type)/ Φ130.45u 200张/盒
硅溶胶/Silica solution/ BR,30% 500克
原色硅胶/Silicagel,original color/7631-86-9 AR 500克
硅胶H/Silica gel H/112926-00-8 TLC 500克
硅胶板G/Silica gel G Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,2.5×7.5㎝ 80片/箱
硅胶板H/Silica gel H Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,10×20㎝ 10片/箱

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杂交袋

乙酸纤维素薄膜|乙酸纤维素薄膜的规格

详细介绍

“乙酸纤维素薄膜
别名:乙酸纤维素膜 醋酸纤维素膜 醋纤膜 Cellulose acetate layer sheets
货号:JS11740
CAS号:
规格:2×8cm
包装:100张
保存条件:常温

产品详细资料如下:

乙酸纤维素薄膜,规格:2×8cm,100张,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
尼龙膜N+/Hybond-N+/ 0.45um 15×20cm/张
封口膜/Parafilm/ 4″×125 ft 1卷
微孔滤膜(混纤)/Millipore filter/ Φ130.22μ 200张/盒
硅溶胶/Silica solution/ BR,30% 500克
硅胶/Silica gel/7631-86-9 FCP,60-100目 500克
硅胶60G/Silica gel 60G/112926-00-8 TLC 500克
硅胶板G/Silica gel G Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,2.5×7.5㎝ 80片/箱
硅胶板H/Silica gel H Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,10×20㎝ 10片/箱
聚酰胺/Polyamide/63428-84-2 柱层析,14-30目 500克

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乙酸纤维素薄膜|乙酸纤维素薄膜的规格

杂交袋/Seal-A-Meal/

详细介绍

“杂交袋
别名:Seal-A-Meal
货号:JS11737
CAS号:
规格:15×25㎝
包装:100张/包
保存条件:常温

产品详细资料如下:

杂交袋,规格:15×25㎝,100张/包,生化试剂专业供应商-,: , ,相关试剂如下:
乙酸纤维素薄膜/Cellulose acetate layer sheets/ 2×8cm 100张
尼龙膜N+/Hybond-N+/ 0.45um 15×20cm/张
F型微孔滤膜/Millipore filter(F type)/ Φ130.45u 200张/盒
硅溶胶/Silica solution/ BR,30% 500克
原色硅胶/Silicagel,original color/7631-86-9 AR 500克
硅胶H/Silica gel H/112926-00-8 TLC 500克
硅胶板G/Silica gel G Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,2.5×7.5㎝ 80片/箱
硅胶板H/Silica gel H Pre-coated Plate for TLC/112926-00-8 TLC,10×20㎝ 10片/箱

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杂交袋/Seal-A-Meal/

pRSETB-Clover载体,大肠系列质粒

    公司介绍:上海生物科技详细为您介绍pRSETB-Clover载体,大肠系列质粒相关的使用说明,价格,品牌,用途等,本司专业供应pCDNA3.1(-)载体,pCDNA3.1(+)载体,pCDNA3.1-3×Myc载体,pECMV-3×FLAG-MCS-IRES-Puro载体,pCAGGS-Myc载体,  pEGFP-N1-Myc-6×His-FLAG载体,4xCSL-Luciferase载体,pHes1(2.5k)-Luc载体,pHes1(467)-luc载体,pCMV-Gluc-1载体,pMRX-IP-GFP-LC3-RFP-LC3ΔG载体,pFN10A (ACT)载体,PQE-70载体,pGEX-6P-3载体,pET-39b载体,pET-44c载体,其他质粒载体等,为回馈新老客户对本司的支持,特在开学季推出质粒载体优惠活动专题,欢迎来电咨询!

    产品简介

    名称:pRSETB-Clover载体,大肠系列质粒

    载体:pRSETB-Clover

    质粒系列:大肠系列质粒

    供应商:上海

    产品规格:5μg

    质粒载体:植物系列质粒,RNA文库质粒,病毒系列质粒,人源基因质粒,酵母系列质粒,大肠系列质粒,哺乳系列质粒,基因文库质粒,质粒其他系列载体

    质粒类型:Gateway系统的DONR载体

    高拷贝/低拷贝:低拷贝

    克隆方法:Gateway

    载体大小:5585

    5' 测序引物及序列:pDONR-F: 5'-TCGCGTTAACGCTAGCATGGATCTC-3'

    3' 测序引物及序列:pDONR-R: 5'-GTAACATCAGAGATTTTGAGACAC-3'

    载体抗性:庆大霉素、 氯霉素

    备注:载体本身含有CCDb致死基因,能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡,必须 使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增,用来构建Gateway系统入门载体;pDONR207尽管含有pUC质粒的起始复制点,但是细菌内仍然是低产量质粒;构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2 感受态细胞。

    病毒/非病毒:非病毒

    质粒载体:植物系列质粒,RNA文库质粒,病毒系列质粒,人源基因质粒,酵母系列质粒,大肠系列质粒,哺乳系列质粒,基因文库质粒,质粒其他系列载体

    pRSETB-Clover载体,大肠系列质粒 订购说明

    1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。

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原创作者:上海生物科技有限公司

吲哚乙酸氧化酶测试盒 可见分光光度法

吲哚乙酸氧化酶测试盒 可见分光光度法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

吲哚乙酸氧化酶测试盒 微量法

吲哚乙酸氧化酶测试盒 微量法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 可见分光光度法

多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 微量法

多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶酯酶测试盒/果胶甲酯酶测试盒 NaOH滴定法

果胶酯酶测试盒/果胶甲酯酶测试盒 NaOH滴定法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶裂解酶测试盒 可见分光光度法

果胶裂解酶测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶裂解酶测试盒 微量法

果胶裂解酶测试盒 微量法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶酶测试盒 可见分光光度法

果胶酶测试盒 可见分光光度法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶酶测试盒 微量法

果胶酶测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶甲酯化程度测试盒 可见分光光度法

果胶甲酯化程度测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果胶甲酯化程度测试盒 微量法

果胶甲酯化程度测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

半乳糖醛酸含量测试盒 可见分光光度法

半乳糖醛酸含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

半乳糖醛酸含量测试盒 微量法

半乳糖醛酸含量测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
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① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

原果胶含量测试盒 可见分光光度法

原果胶含量测试盒 可见分光光度法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
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④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
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(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

原果胶含量测试盒 微量法

原果胶含量测试盒 微量法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

共价结合型果胶(CSP)含量测试盒 可见分光光度法

共价结合型果胶(CSP)含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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共价结合型果胶(CSP)含量测试盒 微量法

共价结合型果胶(CSP)含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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乙醇酸氧化酶测试盒 紫外分光光度法

乙醇酸氧化酶测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

乙醇酸氧化酶测试盒 微量法

乙醇酸氧化酶测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒 紫外分光光度法

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒 微量法

二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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类胡萝卜素(carotenoid)含量测试盒 分光光度法

类胡萝卜素(carotenoid)含量测试盒 分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒 微量法

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒 微量法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒 可见分光光度法

植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒 可见分光光度法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒 微量法

植物叶绿素(chlorophyll)含量测试盒 微量法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

维生素B6测试盒 可见分光光度法

维生素B6测试盒 可见分光光度法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

维生素B6测试盒 微量法

维生素B6测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒 紫外分光光度法

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒 微量法

UDPG焦磷酸化酶(UPG)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒 紫外分光光度法

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒 微量法

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒 紫外分光光度法

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒 微量法

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
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① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

糖原合成酶(GCS)测试盒 紫外分光光度法

糖原合成酶(GCS)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

糖原合成酶(GCS)测试盒 微量法

糖原合成酶(GCS)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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丙酮酸羧化酶(PC)测试盒 紫外分光光度法

丙酮酸羧化酶(PC)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

丙酮酸羧化酶(PC)测试盒 微量法

丙酮酸羧化酶(PC)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)/果糖-1,6-二磷酸酯酶测试盒 紫外分光光度法

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)/果糖-1,6-二磷酸酯酶测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)/果糖-1,6-二磷酸酯酶测试盒 微量法

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)/果糖-1,6-二磷酸酯酶测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)测试盒 紫外分光光度法

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)测试盒 微量法

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒 紫外分光光度法

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒 微量法

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

白蛋白含量测试盒 可见分光光度法

白蛋白含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

白蛋白含量测试盒 微量法

白蛋白含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

BCA蛋白法含量测试盒 可见分光光度法

BCA蛋白法含量测试盒 可见分光光度法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

BCA蛋白法含量测试盒 微量法

BCA蛋白法含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒 可见分光光度法

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒 微量法

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

双缩脲法蛋白含量测试盒 可见分光光度法

双缩脲法蛋白含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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双缩脲法蛋白含量测试盒 微量法

双缩脲法蛋白含量测试盒 微量法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

总皂苷含量测试盒 可见分光光度法

总皂苷含量测试盒 可见分光光度法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

总皂苷含量测试盒 微量法

总皂苷含量测试盒 微量法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

胼胝质含量测试盒 荧光法

胼胝质含量测试盒 荧光法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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高铁还原酶(FCR)测试盒 可见分光光度法

高铁还原酶(FCR)测试盒 可见分光光度法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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高铁还原酶(FCR)测试盒 微量法

高铁还原酶(FCR)测试盒 微量法    正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

亚铁氧化酶(HP)测试盒 可见分光光度法

亚铁氧化酶(HP)测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

亚铁氧化酶(HP)测试盒 微量法

亚铁氧化酶(HP)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒 紫外分光光度法

肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒 微量法

肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒 紫外分光光度法

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒 微量法

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

木质素含量测试盒 紫外分光光度法

木质素含量测试盒 紫外分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

木质素含量测试盒 微量法

木质素含量测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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木质素过氧化物酶(LiP)测试盒 可见分光光度法

木质素过氧化物酶(LiP)测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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木质素过氧化物酶(LiP)测试盒 微量法

木质素过氧化物酶(LiP)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

锰过氧化物酶(MnP)测试盒 可见分光光度法

锰过氧化物酶(MnP)测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

锰过氧化物酶(MnP)测试盒 微量法

锰过氧化物酶(MnP)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植物根系活力 可见分光光度法

植物根系活力 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:40T
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

脱氢酶(DHA)测试盒 可见分光光度法

脱氢酶(DHA)测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

脱氢酶(DHA)测试盒 微量法

脱氢酶(DHA)测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植酸含量测试盒 可见分光光度法

植酸含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

植酸含量测试盒 微量法

植酸含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

生物碱含量测试盒 可见分光光度法

生物碱含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

生物碱含量测试盒 微量法

生物碱含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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甜菜碱含量测试盒 可见分光光度法

甜菜碱含量测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

甜菜碱含量测试盒 微量法

甜菜碱含量测试盒 微量法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

单胺氧化酶(MAO)测试盒 可见分光光度法

单胺氧化酶(MAO)测试盒 可见分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

单胺氧化酶(MAO)测试盒 微量法

单胺氧化酶(MAO)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

乙酸激酶(ACK)测试盒 紫外分光光度法

乙酸激酶(ACK)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

乙酸激酶(ACK)测试盒 微量法

乙酸激酶(ACK)测试盒 微量法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 紫外分光光度法

4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 紫外分光光度法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 微量法

4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)测试盒 微量法 正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒 紫外分光光度法

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒 紫外分光光度法  正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

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肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒 微量法

肉桂醇脱氢酶(CAD)测试盒 微量法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司

H2S含量测试盒 可见分光光度法

H2S含量测试盒 可见分光光度法   正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
规格:100管/48样,100管/96样 ;  50管/24样,50管/48样
测定方法:可见分光光度法,微量法

需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体1.5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂四:液体25mL×1瓶,-20℃保存;
试剂五:液体1mL×1支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入2mL蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

样本的处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定

(1)工作液于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、200μL工作液和15μL试剂六,混匀,记录340nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
复合体Ⅰ活力单位的计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1808×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=365×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.73×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3616×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
 复合体Ⅰ活力(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=730×ΔA÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
复合体Ⅰ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.46×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,2 min;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

原创作者:上海生物科技有限公司