标签:mrna

mRNA的分离和纯化 mRNA的提取及纯化(磁珠法和亲和柱层析法)

2023年6月14日 作者 jinpanbio
核细胞的mRAN是单顺反子,其最显著的特征是具有5'端帽子结构和3'端的poly A的结构,此poly A结构为mRNA的提取提供了有效的途径,人们利用碱基配对原理,采用寡聚T结构作为亲和柱材料,当含mRNA的总RNA样品流经寡聚T柱时,mRAN即被特异性的结合到柱上,从而可与其它RNA相分开,这就是寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)琼脂糖亲和柱分离mRAN的原理。目前虽然mRNA的提取已有多种方法,如超速离心法、免疫法,但较常用的、简便的方法还应是柱层析法。不过近几年,mRNA的提取方法又有所改进和突破,mRNA的磁珠分离即是这些新方法中的一类主要技术。该技术建立于3类强有力的相互作用上,即A与T碱基间的强配对性;链菌素抗生物素与生物素间的强免疫作用及稀土元素磁铁与顺磁性物质间的强磁性作用。mRNA的磁珠分离技术提取mRNA的原理主要为用生物素标记的Oligo(dT)与mRNA3'端的poly A退火形成杂交体,然后用带有亲和素(链菌素抗生物素)的顺磁磁珠洗涤并捕获杂交体,形成杂交体-磁珠复合体,最后用磁架将此复合体捕获,这样mRNA即可与其它形式的RNA相分开,进一步用无RNase无菌水洗涤,即可获得纯化的mRNA。阅读全文

NEB代理,RNA 试剂,RNA 合成,mRNA 脱帽酶,#M0608S

2022年11月7日 作者 jinpanbio
产品资料 - RNA 试剂 RNA 合成

mRNA 脱帽酶

#M0608S 2,000

特性

mRN脱帽酶可使带有帽结构的mRN脱帽,产生’单磷酸末端。

有效替代烟草酸焦磷酸酶TA

去除Cap Cap 的效率相同

适用于RLM-RACRNA-se

1 µ的酶可在15 mi内将20 µmRN1.7 k)完成脱帽

产品信息

mRN脱帽酶可以将mRNA ’末端的7甲基鸟苷帽)结构去除,产生’单磷酸末端并释放GDmRN脱帽酶能够使各种长度的mRN脱帽,对Cap Cap 的去除效率相同。mRN脱帽酶也可将’三磷酸末端转化为’单磷酸,但转化效率相对较低。’单磷酸化的RN可用于多种下游应用,包括RN连接酶介导的RACRNA-se’核酸外切酶消化。

mRN脱帽酶MD)和烟草酸焦磷酸酶...

阅读全文