2X qPCR SYBR Green Master Mix(抗体法，Rox Provided Seperately)

产品优势：
热启动酶以及优化的缓冲体系，使实时荧光定量PCR具有更高的特异性和灵敏度。

产品简介：
2 x qPCR SYBR Green Master Mix(抗体法，Rox Provided Seperately)是实时荧光定量PCR的预混合溶液，采用SYBR Green I染料法，仅需要加入模板和引物即可进行实时荧光定量PCR，减少操作步骤，降低污染几率。产品中包含热启动Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTP、Mg²⁺。本品中的热启动Taq酶是采用抗体封闭法，经qPCR反应程序中的预变性阶段后即可释放Taq DNA Polymerase酶活，可以有效抑制样品准备过程中引物退火导致的非特异性扩增，同时配以针对染料法qPCR优化的Buffer，使实时荧光定量PCR具有更高的特异性和灵敏度。本产品针对不同型号的实时荧光定量PCR仪，分别提供不同浓度的 Rox 参比液（High Rox/Low Rox），用于校正孔与孔之间的荧光信号误差。

产品应用
本产品适用于DNA样本的扩增定量，样本类型可以是基因组DNA、cDNA、质粒DNA、λDNA。

运输与保存方法
-20℃避光保存。≤ 0℃避光运输。有效期18个月。

适用机型
High Rox适用机型：
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus;
Low Rox 适用机型：
ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio6,7,12k Flex; Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;  
不需要Rox校正的仪器型号：
Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific PikoReal Cycler;
Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.

数据展示

 
图1：图 A 是将 cDNA模板进行 6个 10 倍梯度稀释的扩增曲线，图 B 是根据图 A 的 CT 值得出的标准曲线。提取293T细胞全RNA，并逆转录成cDNA。以cDNA为模板，扩增目标基因，使用 2 x qPCR SYBR Green Master Mix预混液对各稀释梯度模板进行检测。结果显示，本品在宽广的模板量区间内具有优秀的线性关系。（仪器型号：Thermo pikoreal 96）

 
图2：以 293T细胞 cDNA 为模板， 使用2 x qPCR SYBR Green Master Mix预混液以及市售竞品染料法qPCR 试剂，在同样反应条件下进行扩增相同的目标片段。结果显示， 2 x qPCR SYBR Green Master Mix预混液扩增产物产量高，拥有更高的平台值。（仪器型号：Thermo pikoreal 96）

 
图3： 2 x qPCR SYBR Green Master Mix冻融稳定性检测。以 293T cDNA 为模板， 将2 x qPCR SYBR Green Master Mix预混液反复冻融不同次数，在同样反应条件下进行扩增相同的目标片段。结果显示，不同冻融次数之间扩增的CT值无区别。（仪器型号：Thermo pikoreal 96）

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