NEB代理,蛋白表达和纯化技术,pMAL-c6T 载体#N0378S

2022年11月8日 作者 jinpanbio
产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

pMAL-c6T 载体

#N0378S  10 µg

特性

 ·pMAL-c6T 是 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统(NEB#E8201)中推荐的载体

 ·目标蛋白与 MBP 融合表达可显著增强其在大肠杆菌中的溶解度和正确折叠(1)
 ·载体包含 His-tag 和 TEV 蛋白酶识别位点,使用 TEV 蛋白酶(NEB#P8112)可将目标蛋白从 MBP 上切下来
 ·两步纯化:Amylose 树脂洗脱后进行 TEV 蛋白酶切割和 Ni 树脂分离,终产物为高纯度、无标签的靶蛋白
 ·经设计改造,MBP 可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。
 ·具有氨苄青霉素抗性

概述

 pMAL-c6T 载体提供了一种从克隆基因或开放阅读框到蛋白表达的方法。克隆基因插入到大肠杆菌的 malE 基因下游,malE 基因编码麦芽糖结合蛋白(MBP),从而使 MBP 融合蛋白在细胞质中表达(1,2)。MBP 经设计改造,可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。该方法利用 “tac” 强启动子和 malE 翻译起始信号,使克隆序列得到高水平表达(3,4),同时可利用 MBP 对麦芽糖的亲和力,一步纯化融合蛋白(5)。该载体表达 N 端六组氨酸标记的 malE 基因(缺少分泌信号序列),随后是包含 TEV 蛋白酶识别序列的多克隆酶切位点,以及三位终止密码子。从而可在纯化后,使用 TEV 蛋白酶将 MBP 从目标蛋白上切下来。该载体还携带 lacIq 基因,该基因编码 Lac 阻遏蛋白。在没有 IPTG 诱导的情况下,可使 Ptac 低水平表达

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统 :大肠杆菌

pMAL-c6T 载体的 malE 基因上具有明确的信号序列缺失,箭头指示转录方向,多克隆酶切位点(MCS)中标注了限制性内切酶位点

产品来源
NEB-10 beta competent E. coli (pMAL-c6T)

亲和标记
麦芽糖结合蛋白(MBP)
储存温度
-20°C
序列信息
Fasta GenBank