NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 合成

2022年11月8日 作者 jinpanbio
产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

HiScribe™ T7 mRNA 合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)                             

货 号
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#E2080S
20 次反应
7,079.00

      


产品特点

·使用 1 µg 对照模板,单次反应可转录高达 90 µg Cap-1 mRNA

·独立包装的 NTP 适用于全部/部分修饰 NTPs 替换
·试剂盒包含模板去除和 RNA 纯化试剂
·试剂盒包含线性对照模板,用于验证 CleanCap® Reagent AG 的 RNA 合成效果

产品概述

 对于大多数真核生物来说,mRNA 需要 5’端带有 7-甲基鸟苷(m7G)帽结构,3’端带有 poly(A)尾才能有效翻译。HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)优化了 RNA 合成配方,利用三核苷酸帽结构类似物技术,通过一步共转录加帽即可获得带有天然的 Cap-1 结构的 mRNA,且不会影响 RNA 产量。使用含 T7 启动子序列、AG 起始的目标序列和 poly(A)尾编码序列的 DNA 模板,即可转录带有 5’-m7G Cap-1 和 poly(A)尾的 mRNA,该 mRNA 能够有效翻译并能逃避细胞先天免疫反应。

 
HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap® Reagent AG)包含独立包装的 NTP 和 CleanCap Reagent AG,适用于全部/部分修饰 NTPs 替换,试剂盒总产量为 1.8 mg mRNA。使用该试剂盒合成的 Cap-1 mRNA 适用于多种应用,包括:转染、显微注射、体外翻译、临床前 mRNA 治疗研究以及 RNA 结构和功能分析。
 
该试剂盒可完成 20 次共转录反应(20 μl 体系)。使用 1 μg CLuc AG 对照模板 DNA 进行标准反应,可转录≥90 μg RNA。每个试剂盒的产量≥1.8 mg RNA。
 
图 1:CleanCap Reagent AG 分子结构
 
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图 2:使用 CleanCap Reagent AG 时,启动子和起始序列示意图
 
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图 3:CleanCap Reagent AG 比 ARCA 的mRNA 合成产量更高

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所有反应均使用 5 mM CTP、5 mM UTP 和 6 mM ATP 进行。标准 IVT 反应使用 5 mM GTP,不添加帽结构类似物。ARCA 反应使用 4:1 的 ARCA:GTP(4 mM:1 mM)。含 CleanCap Reagent AG 的 IVT 反应使用 5 mM GTP 和 4 mM CleanCap Reagent AG,反应体系分别参照以下说明书配制:标准 mRNA 合成和 HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap Reagent AG))。反应在 37℃ 下孵育 2 小时,通过 NanoDrop 检测纯度和定量。