一氧化氮检测试剂盒(显色法)

2022年7月15日 作者 jinpanbio

一氧化氮检测试剂盒(显色法)是一种活性基,在许多关键生理功能中发挥重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸的氧化产物,参与宿主防御和发育、调节蛋白活化、以及与功能生物分子之间的直接共价相互作用。

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

一氧化氮检测试剂盒(显色法)

产品标签

Nitric Oxide (NO) 一氧化氮;NO含量检测;分光光度计检测;Griess reagentCarboxy-PTIO 一氧化氮清除剂DAF-FM DA 

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

一氧化氮检测试剂盒(显色法)

MX4731-500T

500T

729

产品描述

一氧化氮(Nitric Oxide, NO)是一种活性基,在许多关键生理功能中发挥重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸的氧化产物,参与宿主防御和发育、调节蛋白活化、以及与功能生物分子之间的直接共价相互作用。一氧化氮生成后迅速代谢生成亚硝酸盐(Nitrite)和硝酸盐(Nitrate),两种首要的、稳定的和非挥发性的裂解产物,通过对这两种产物的测定能间接反映样本内的一氧化氮水平。

一氧化氮检测试剂盒(Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit)利用经典的Griess reagent,对亚硝酸盐进行定量测定。本试剂盒以亚硝酸钠为标准品,通过优化检测体系,检测下限达1μM,且在1~100μM范围内具有好的的线性关系。本试剂盒不仅能检测细胞、组织或培养液中的一氧化氮含量,还能检测血清、血浆或尿液中的一氧化氮含量。

产品组成

组分编号

组分名称

规格

保存方式

MX4731-A

1M NaNO2

1ml

2-8避光保存

MX4731-B

Griess Reagent I

25mL

2-8避光保存

MX4731-C

Griess Reagent II

25mL

2-8避光保存

保存与运输方法

保存:2-8避光保存,至少4个月稳定。

运输:冰袋运输。

保存与运输方法

保存:-20℃干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

  • 本试剂盒内的组分若保存不当发生颜色变化或沉淀,说明溶液已经失效,请勿再用。
  • 当检测细胞或组织一氧化氮含量,不建议使用RIPA裂解液,因其可能在后续实验中产生沉淀,影响测试。建议使用免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)(货号:MP1508-100ML)。
  • 本试剂盒仅测定的是亚硝酸盐含量,不能检测硝酸盐,反映的并非总一氧化氮含量,只能在很大程度上反映一氧化氮的相对量,适合不需要精确定量的实验。若需要测定总一氧化氮含量,请选择总一氧化氮检测试剂盒(显色法)(货号:MX4732-50T),此试剂盒利用硝酸盐还原酶将硝酸盐还原为亚硝酸盐,然后利用Griess reagent测定亚硝酸盐,进而反映总一氧化氮水平。
  • 本试剂盒对人体有害,请注意适当防护,避免直接接触人体或吸入体内。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

【注意】本试剂盒可用于培养液中的一氧化氮测定,培养液内的酚红和10%血清对测定无明显干扰。

【注意】本试剂盒可用于血清中的一氧化氮测定。当只需粗略计算,可直接用水稀释标准品,从而计算出血样中一氧化氮含量。当需精确计算,如果待测的正常血清是常见血清,能从文献查阅到一氧化氮浓度,那么用此已经一氧化氮浓度的正常血清稀释标准品,这样能得到比较精确的一氧化氮浓度。或使用已知浓度的人或其他动物血清来稀释标准品也可达到目的。或参考文献进行血清中一氧化氮浓度的测定。

【注意】样品中存在的一些内在成分可能会干扰测定,导致OD值和灵敏度降低。干扰程度依次顺序:尿液>血清>血浆>培养基。

  • 需要设备

96孔酶标仪或可见光分光光度计,加波长540nm,或在520~560nm下测定,灵敏度可能会降低。

  • 准备步骤

2.1 实验前将试剂从冰箱取出回温至室温。

2.2 标准品准备:每次测量均新做标准曲线,用待测样品所用溶液来稀释标准品,使得浓度在1~100μM内

比如:当样品为细胞培养液上清,细胞培养液为DMEM+10% FBS,则用DMEM+10% FBS稀释标准品。标准品的浓度通常可取0,1,2,5,10,20,40,60,80,100μM

2.3 样品准备:a)当样品为培养液上清,可直接取样。如果存在沉淀物,则需离心后取上清;b)当样品为组织或细胞,可快速冻融裂解,然后离心沉淀取上清,体积不足50μl,可用双蒸水、超纯水或0.9% NaCl稀释(相应的标准品也需用双蒸水、超纯水或0.9% NaCl稀释)。细胞或组织也可用免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)来裂解,同样的,标准品需用裂解液稀释。

三、测定步骤

3.1 取50μl标准品或样品,加入96孔板内,做好标记

3.2 每孔加入提前回至室温的50μl Griess reagent I

3.3 每孔加入提前回至室温的50μl Griess reagent II

3.4 室温避光孵育5min;

3.5 在540nm(或520~560nm)测定吸光度。需在30min内测完,以防褪色降低灵敏度。

3.6 以标准品浓度为横坐标,吸光度OD值为纵坐标绘制标准曲线,获得横纵坐标之间的函数关系式。之后将样品OD值代入公式来计算一氧化氮浓度。

相关产品

货号

名称

规格

MP1508-100ML

免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)

100ml

MX4731-500T

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 一氧化氮检测试剂盒(显色法)

500T

MX4732-50T

Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 总一氧化氮检测试剂盒(显色法)

50T

MX4701-10MG

Carboxy-PTIO 一氧化氮(NO)清除剂

10mg

MX4702-100T

DAF-FM DA (5mM in DMSO) 一氧化氮(NO)荧光探针

100T

MX4712-25G

Sodium Nitroprusside (SNP) Dihydrate 硝普钠二水合物

25g

MX4713-10MG

S-Nitrosoglutathione (GSNO) 亚硝基谷胱甘肽

10mg

MX4714-100MG

2,3-Diaminonaphthalene (DAN), Suitable for fluorescence 2,3-二氨基萘

100mg

MX4715-100MG

1,2-Diaminoanthraquinone (DAA, DAQ) 1,2-二氨基蒽醌

100mg

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【】

 

 

上海金畔生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承以人为本,以诚为信、合同守信的经营理念。坚持品质保障的原则为广大客户提供优质产品。

一氧化氮检测试剂盒(显色法)

一氧化氮检测试剂盒(显色法)