细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

2022年7月15日 作者 jinpanbio

本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)采用*的甲臜溶解液,能够非常好的完全甲臜结晶,使检测本底低、灵敏度高,且线性范围宽。

MTT Cell Proliferation Assay Kit

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

 

搜索关键词: 

MTT 噻唑兰台盼蓝染色法CCK-8 细胞增殖和毒性检测试剂盒;WST-8;CAS298-93-1

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

MX3005-500T

500T

279

MX3005-1000T

1000T

499

 

基本描述:

噻唑兰(Methylthiazolyldiphenyltetrazolium bromide, 简称MTT,CAS:298-93-1),也称作溴化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,已经广泛替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法,用来检测细胞活力细胞增殖以及毒性分析。MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的蓝紫色MTT-甲臜结晶,死细胞不具此功能。甲臜结晶不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。在特定溶剂的作用下完全溶解甲臜结晶,然后通过酶标仪测定570 nm附近的吸光度。细胞增殖越多,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)采用*的甲臜溶解液,能够非常好的完全甲臜结晶,使检测本底低、灵敏度高,且线性范围宽。

 

产品组分

组分编号

组分名称

保存方法

货号(规格)

MX3005500T

MX30051000T

MX3005-A

MTT Solution MTT溶液(5mg/ml

-20避光

5ml

2×5ml

MX3005-B

Formazan Solvent 甲臜溶解液

-20或室温

60ml

2×60ml

 

注意事项

  • 使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、无菌水或培养液;可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。
  • MTT溶液在低温下会凝固,请置于室温或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后再使用。
  • MTT溶液需尽量减少反复冻融的次数,若单次用量很少,建议根据需求分装后置于-20℃保存。MTT溶液颜色如变为灰绿色,请勿使用。

4) 甲臜溶解液当置于-20℃保存需解冻使用,或室温保存产生沉淀,可置于37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须全部溶解后混匀使用。

5) 加入甲臜溶解液后请轻轻混匀,但需注意避免产生泡沫。亦可借助显微镜观察甲臜是否完全溶解。

6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(以96孔板为例)

  • 收集对数生长期的细胞,用含血清的培养液配制成单细胞悬液,调整细胞密度,以每孔3000-10,000个细胞接种到96孔板,每孔体积100µl,培养板的边缘孔用无菌PBS填充。设置空白孔和对照孔

【注】:通常情况,细胞增殖实验每孔加3000个细胞,细胞毒性实验每孔加6000个细胞。具体每孔所用细胞数目,需根据细胞大小、增殖速度的快慢等来决定。

【注】:需设置空白孔(不含细胞,含培养液、MTT甲臜溶解液),对照孔(含细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT甲臜溶解液),每组设置3个复孔。

  • 37,5% CO2继续培养或根据实验具体需求进行培养一般培养624h。
  • 根据实验具体需求,给予0-20µl干预药物处理,37,5% CO2继续培养至合适时间。
  • 小心吸掉培养液,每孔加入100µl新鲜培养液,再加入10µl MTT溶液(5 mg/ml)加样时尽量勤换枪头,控制加量误差。继续培养4h。
  • 小心吸掉培养液,每孔加入110µl 甲臜溶解液,置摇床上低速振荡10min,使得结晶物充分溶解。可在光学显微镜下观察结晶物是否完全溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短些;如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长些。
  • 在酶标仪上摇匀后,选择570nm,测定吸光度。记录结果,比色空白调零。

】:对于细胞毒性检测,以未经药物处理细胞的OD值为好的,然后计算药物处理细胞所占的比率(x),公式如下:OD(未经药物处理细胞)/OD(药物处理细胞)好的。然后建立直方图

 

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产品名称

规格

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 — —Written/Edited by V. Shallan【】

 

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细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

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