Leadmium™ Green AM 铅荧光探针与细胞染色

以上产品均为Life（Invitrogen）原装正品，原始包装为5×50 µg（5支50µg单个包装构成）。我司对A10024进行拆开销售，特惠价为900元/支，单支50µg，现货销售，欢迎订购。

【温馨提示】：见我司整理的金属离子【钙，钾，钠，锌，镁，氯，铅离子】荧光染色探针产品专题。

基本介绍：

Leadmium™ Green AM dye（铅离子/镉离子绿色荧光探针）是Life旗下品牌Molecular Probe的产品，是一种*的工具用来高度特异性和高灵敏度的检测细胞内铅离子（lead）和镉（cadmium）水平。当溶液内铅离子和镉离子测定的标准实验建立后，这一*的Leadmium™ Green AM探针能特别设计用来检测活细胞内这些有毒的环境污染重金属。

产品特点

1） 高特异性探针（指示剂）用来检测细胞内铅和镉水平；

2） 灵活的检测方式，适用于流式细胞仪、荧光显微镜成像和荧光酶标板检测；

3） 明亮的荧光和高度鉴别镉离子，能检测到纳摩尔（nM）水平的铅离子和微摩尔（µM）水平的镉离子；

4） 检测方便，只需用488nm激光激发即可；

5） 探针轻易加载进入细胞，进入细胞内经酯酶水解后能极好的保存在细胞内。

产品保存

一旦收到本品，置于≤-20℃保存。一旦配制，Leadmium™ Green AM dye溶液（in DMSO）请在一天内用完。

实验前试剂准备

1、需要的材料（自行准备）

生理盐水（0.85% NaCl）【不能使用PBS】; DMSO（高质量，无水，如Cat#：MS4601-100mL）

2、 其他试剂（自行准备）

PbCl2溶液；CdCl2溶液；TPEN（tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine）；乙醇；

离子霉素钙盐（货号：MZ2152-1MG）；死细胞染料比如碘化丙啶（Cat#：MX4205-10MG）。

3、 试剂准备

3.1 从冰箱内取出一管Leadmium™ Green AM dye（50 µg），让其回温到室温，避光保存。

3.2 往管子内加入50µl 高质量无水的DMSO（Cat#：MS4601-100mL），避光混匀，使其充分溶解。

3.3 用生理盐水按照1：10的比例将Leadmium™ Green AM dye的DMSO储存液稀释成工作液（比如取20µl 储存液加到180µl生理盐水，混匀），所有溶液制备过程一直避光。

3.4 37℃温育生理盐水，用于后续多个步骤的清洗过程。

3.5 【可选】如果此实验需要设置相对对照（用已经浓度的PbCl2处理细胞），建议PbCl2的起始浓度范围是1nM-625nM。制备625nM PbCl2【添加250µl 10µM PbCl2到3.75ml生理盐水。然后做9次连续性梯度稀释zui终得到1nM PbCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。

3.6 【可选】如果此实验需要设置相对对照（用已经浓度的CdCl2处理细胞），建议CdCl2的起始浓度范围是1µM-250µM。制备250µM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到3ml生理盐水。然后做8次连续性梯度稀释zui终得到1µM CdCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。

3.7 【可选】制备10mM TPEN工作液，通过添加1.2ml无水乙醇到5mg TPEN。混匀，室温保存。

操作流程【流式分析，具体leadmium Green AM dye Manual】

应用实例：

Figure 1. Dual-color scatter plot showing two populations. Jurkat cells were loaded with Leadmium™ Green AM dye and washed. The sample was then incubated in the presence of 1 µM PbCl2 (in saline) and 1 µM ionomycin. After washing the sample, it was incubated in the presence of PI. Dual-color fluorescence was collected using 488 nm excitation and 525/10 nm and 610/10 nm bandpass filters. This results in visualization of two populations: dead cells (positive for PI) and live cells that contain lead (positive for Leadmium™ Green dye and negative for PI).

发表文献（A10024）：

Cellular sequestration of cadmium in the hyperaccumulator plant species Sedum alfredii. PubMed ID: 22025609

A new ABC half-transporter in Leishmania major is involved in resistance to antimony.  PubMed ID: 23716044

Increased nuclear thioredoxin-1 potentiates cadmium-induced cytotoxicity. PubMed ID: 22961094

 Leadmium™ Green AM 铅荧光探针与细胞染色

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