标签：BCECF 是使用细胞内 pH 探针

BCECF 是最广泛使用的细胞内 pH 探针。 Tsien 博士和其他人通过引入两种额外的羧酸盐来改进这种羧基荧光素，使其能够更好地被细胞保留。 BCECF 是高度水溶性的，因为它在中性 pH 下具有 4 至 5 个负电荷；加载后变得难以通过细胞膜。其 pKa 值为 6.97，高于羧基荧光素。 BCECF在激发光谱中在439 nm处有一个等吸收点，因此可用于比率测定，类似于Fura 2。比率测定通常使用505 nm和439 nm的波长，设置490 nm和450 nm滤光片在激发光源前。 530 nm 滤光片用于其荧光信号。请注意，激发光谱与吸收光谱略有不同。 BCECF-AM 是 BCECF 的乙酰氧基甲酯，可以轻松地将 BCECF 加载到细胞中。 BCECF-AM 与其他乙酰氧基甲酯一样，仅通过孵育才能在细胞中积累。 BCECF-AM 对水分非常敏感；应该小心处理。 DMSO 溶液的颜色随着 AM 形式的分解从淡黄色变为深橙色。因此，可以通过颜色变化来监测 AM 酯的水解。阅读全文