Dojindo,总谷胱甘肽定量试剂盒/100/T419
2022年4月27日
谷胱甘肽 (GSH) 是动物组织、植物组织、细菌和酵母中含量最丰富的硫醇化合物。 GSH 具有许多不同的作用，包括防止活性氧和维持蛋白质硫醇基团。在这些过程中，GSH 被转化为其氧化形式，谷胱甘肽二硫化物 (GSSG)。由于 GSSG 随后被谷胱甘肽还原酶酶促还原，因此 GSH 是生物体中的主要形式。 DTNB（5,5 EDithiobis(2-nitrobenzoic acid)）被称为 Ellman 试剂，用于检测硫醇化合物。 1985年，M. E. Anderson博士提出DTNB和谷胱甘肽还原酶的谷胱甘肽循环系统可以作为一种高灵敏度的谷胱甘肽检测方法。 DTNB 和 GSH 反应生成图 1 中的 5-Mercapto-2-nitrobenzoic acid (TNB)。由于 TNB 是黄色的，样品溶液中的 GSH 浓度可以通过 O.D. 确定。在 412 nm 吸光度下测量（图 2）。 GSH 通过谷胱甘肽还原酶从 GS-TNB 再生，并再次与 DTNB 反应生成 TNB。这种再循环反应提高了总谷胱甘肽检测的灵敏度。总谷胱甘肽定量试剂盒包含总谷胱甘肽测量所需的所有试剂，样品制备中使用的试剂除外。推荐使用 5-磺基水杨酸从样品溶液中去除蛋白质，并防止 GSH 氧化和 γ-谷氨酰转肽酶反应。但是，样品制备的最佳方法因样品而异，因此请查看参考资料。该试剂盒可用于使用标准方法定量 1 μM 至 100 μM 的总谷胱甘肽浓度。对于较低的谷胱甘肽浓度，例如在血液样本中，需要更长的孵育时间。阅读全文