NEB代理,RNA 试剂,cDNA 合成,ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒
2022年11月7日产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成
ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒
#E6300L150 次反应
#E6300S30 次反应
相关产品
mRNA 磁性分离试剂盒
特性
提供酶混合液与反应混合液，建立反应更加便捷
适合各种需求的 PCR
不同起始量的 RNA 都能高效反转录
合成至少 5 kb 长度的 cDNA
合成至少 5 kb 长度的 cDNA
概述
ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液，ProtoScript 酶混合液与 ProtoScript 反应混合液。ProtoScript 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂；ProtoScript 反应混合液含 dNTP 与经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。合成的第一链 cDNA 产物长度可超过 13.0 kb。该试剂盒曾用名为 M-MuLV cDNA 第一链合成试剂盒。
ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒组份
– 10X ProtoScript 酶混合液
– 2X ProtoScript 反应混合液
– 随机引物混合液（60 μM）、Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**、无核酸酶污染的水
**Oligo d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP
**Oligo d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP
使用 ProtoScript 试剂盒合成第一链 cDNA 。反应温度为 42℃，模板为 2 μg 人脾总 RNA。阴性对照反应（-RT）使用 1X ProtoScript 反应混合液进行。以部分第一链 cDNA 产物为模板，使用 1X LongAmp® Taq 2X 预混液（NEB #M0287）扩增三种不同信使 RNA 的特异序列。泳道 1：β 肌动蛋白基因的 1.1 kb 片段；泳道 2：β 肌动蛋白基因 1.1 kb 片段的–RT对照；泳道 3：Xrn-1 基因的 4.7 kb 片段；泳道 4：Xrn-1 基因 4.7 kb 片段的–RT对照；泳道 5：鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 的 9.8 kb 片段；泳道 6：鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 9.8 kb 片段的 -RT 对照。Marker M 为 2-Log DNA Ladder（NEB #N3200）。